Skip to content

Mutacje związane z nabytą opornością na blokadę PD-1 w czerniaku ad 6

1 miesiąc ago

315 words

Dotyczyło to odpowiedzi pSTAT1 (Figura 3A) i ekspresji cząsteczek PD-L1 i MHC klasy I (Figura 3A i 3B). Postępująca linia komórkowa również nie regulowała w górę szerszego panelu indukowanych przez interferon transkryptów zaangażowanych w prezentację antygenu i chemotaksję komórek T (figura 3C i tabela S6 w dodatkowym dodatku). Łącznie dane te wskazują na całkowitą utratę funkcjonalnej odpowiedzi na interferon gamma i są zgodne z tym, że JAK2 jest wymagana do sygnalizacji przez receptor interferonu-., w przeciwieństwie do receptora interferonu . / ., który wykorzystuje TYK2 i JAK1.27-29. Utrata wywołanego interferonem gamma wzrostu za pośrednictwem nabytych mutacji JAK
Figura 4. Figura 4. Utrata zahamowania wzrostu indukowanego przez interferon gamma przez nabyte mutacje JAK. W panelu A, macierzysta linia komórkowa M407, jak również nokaut M407 JAK1 i subliny z nokautem JAK2 zostały rozpoznane przez NY-ESO-1- specyficzne limfocyty T ograniczone przez HLA-A * 02: 01, jak oceniono przez wytwarzanie interferonu-. po 24 godzinach hodowli współ-bakterii in vitro. M420 jest ujemny dla HLA-A * 02: 01 i służył jako kontrola negatywna. W panelu B linie komórkowe M420 i M407 wykazywały hamowanie wzrostu w odpowiedzi na bezpośrednie leczenie in vitro interferonem alfa, beta lub gamma (po lewej), podczas gdy odpowiednik JAK2-brak M464 i nokaut M407 JAK2 były niewrażliwe specyficznie na interferon gamma ( środkowy). Otwór M407 JAK1 był niewrażliwy na wszystkie trzy interferony (z prawej). W panelu C traktowanie 2 3 -cGAMP (cykliczny monofosforan guanozyny-adenozyny), bezpośredni agonista cytosolowy stymulatora genów interferonu (STING), był w stanie wywołać zatrzymanie wzrostu we wszystkich liniach komórkowych, niezależnie od statusu JAK2 , jednak nie wywierał żadnego efektu w M407 z nokautem JAK1. Krzywe wzrostu przedstawiają procentową zmianę liczby komórek czerniaka w czasie mierzoną za pomocą ciągłego obrazowania żywych komórek IncuCyte w jednym z trzech niezależnych eksperymentów. I słupki w panelach A, B i C wskazują odchylenia standardowe dla trzech powtórzonych studzienek. Trzy gwiazdki oznaczają P <0,001 i dwie gwiazdki P <0,01 dla procentowej zmiany wzrostu z obróbką pokazaną w 72-godzinnym punkcie końcowym w porównaniu z nietraktowaną kontrolą, z korektą wielokrotnego porównania Dunnetta zastosowaną w Panelu B. NS oznacza nie znaczący.
Postawiliśmy hipotezę, że dezaktywacja mutacji JAK może dać przewagę funkcjonalną progresywnym nowotworom, ponieważ brak sygnalizacji interferonu albo zmniejszył prezentację antygenu, albo pozwolił na ucieczkę od indukowanego interferonem zahamowania wzrostu. Oprócz zastosowania M420 i M464 opracowaliśmy linię komórkową ludzkiego czerniaka M407 za pomocą CRISPR (skupione regularnie przeplecione krótkie krótkie powtórzenia palindromowe) – podejście do tworzenia sublin bez ekspresji JAK1 lub JAK2 (Rys. S10 i S11 w Dodatku Dodatek). Te stworzone mutacje ścinające analogiczne do tych z Pacjentów i 2 oraz M407 są pozytywne dla HLA-A * 02: 01 i wyrażają antygen nowotworowo-jądrowy NY-ESO-1, który umożliwił nam modelowanie rozpoznawania komórek T przy użyciu komórek T zmodyfikowane genetycznie w celu ekspresji specyficznego dla NY-ESO-1 receptora komórek T.23 M407 i obydwu podlinin strat JAK zostały równie rozpoznane przez specyficzne dla NY-ESO-1 komórki T, prowadząc do wysokiego poziomu wytwarzania interferonu-. (fig. 4A).
Hodowane w rekombinowanym interferonie alfa, beta lub gamma linie komórek rodzicielskich M420 i M407 wykazywały hamowanie wzrostu wywołane przez interferon w sposób zależny od dawki (Fig.
[hasła pokrewne: przeglądarka skierowań na leczenie sanatoryjne nfz, badania w kierunku cukrzycy, strach przed dentystą forum ]

Powiązane tematy z artykułem: badania w kierunku cukrzycy przeglądarka skierowań na leczenie sanatoryjne nfz strach przed dentystą forum