Skip to content

Mutacje związane z nabytą opornością na blokadę PD-1 w czerniaku ad

1 miesiąc ago

472 words

Po pierwsze, musieli oni mieć obiektywną odpowiedź nowotworu podczas uczestniczenia w badaniu klinicznym z pojedynczym środkiem pembrolizumab.6,7,10,11 Odpowiedzi nowotworu oceniano po 12 tygodniach i potwierdzono 4 tygodnie później, a pacjentów oceniano obrazując co 12 następnie w kolejnych tygodniach, stosując zarówno kryteria oceny odpowiedzi w przypadku guzów litych17, jak i kryteria odpowiedzi immunologicznej.18 Po drugie, pacjenci musieli mieć późną nabytą oporność, zdefiniowaną jako nawrót in situ lub nowy rozwój zmian, mimo ciągłego dawkowania, po ponad 6 miesięcy odpowiedzi na nowotwór. Po trzecie, pacjenci musieli mieć odpowiedni materiał biopsyjny do sekwencjonowania całego egzema w dwóch punktach czasowych: przed rozpoczęciem terapii pembrolizumabem i po progresji choroby. Przetworzyliśmy próbki biopsji guza, jak opisano wcześniej, w celu wykonania analiz patologicznych, uzyskania DNA i RNA i próby ustalenia linii komórkowych.19,20 Immunohistochemiczne, Immunofluorescence, Western Blot i Analizy przepływomierzy
Przeprowadzono analizy immunohistochemiczne i immunofluorescencyjne19, jak również analizę typu Western i analizę cytometrii przepływowej21 i analizowano jak opisano wcześniej. Pełne metody są zawarte w dodatkowym dodatku, dostępnym wraz z pełnym tekstem tego artykułu na stronie.
Analizy profilów genetycznych i transkrypcyjnych
Sekwencjonowanie całego egzonu przeprowadzono w Klinicznym rdzeniu mikromacierzy UCLA przy użyciu biblioteki NimbleGen SeqCap EZ Human Exome Library, wersja 3.0 (Roche). Wywołanie mutacji przeprowadzono jak opisano wcześniej.22 Wybrane profilowanie ekspresji genów w ekspozycji na interferon przeprowadzono za pomocą nCounter (NanoString Technologies). Dane z sekwencjonowania całego egzomu zostały zdeponowane w archiwum National Center for Biotechnology Information Sequence Read Archive pod numerem dostępu SRP076315.
Badania funkcjonalne
Do analizy rozpoznawania transgenicznych komórek T receptora limfocytów T wykorzystano pochodzące od pacjentów i uprzednio ustalone ludzkie linie komórek czerniaka23 z wykorzystaniem testów in vitro hodowli, które wykrywają indukowane przez antygen uwalnianie interferonu-y oszacowane przez enzymatyczny test immunoabsorpcyjny. Testy proliferacji komórek i hamowania wzrostu przeprowadzono przy użyciu zautomatyzowanego systemu obrazowania z żywych komórek (IncuCyte, Essen BioScience) z lub bez ekspozycji na interferony. Pełne metody opisano w Dodatku Uzupełniającym.
Przestudiuj badanie
Dane wygenerowane i zebrane przez badaczy zostały przeanalizowane przez ostatniego autora, który zapewnia kompletność i dokładność danych, analiz i raportowanych wyników. Podsumowania protokołu klinicznego opisali Hamid i wsp. 6 oraz Robert i wsp. 10
Analiza statystyczna
Test t-studenta i dwukierunkowa analiza wariancji wykorzystano do eksperymentów z hodowlą komórkową, z zastosowaniem poprawki Dunnetta do wielokrotnych porównań z nietraktowanymi kontrolami.
Wyniki
Kurs kliniczny i infiltry immunologiczne
Rycina 1. Rycina 1. Wzorzec kliniczny nabytej oporności na programowanie zaprogramowanej śmierci (PD-1) u pacjenta 1. W panelu A, obliczone obrazy tomograficzne pokazują przerzuty do małych komórek jelita grubego na początku badania, w momencie maksymalnej odpowiedzi oraz w momencie nawrotu in situ po roku minimalnej choroby resztkowej; czerwone kropki na wykresie po prawej oznaczają te trzy punkty czasowe
[podobne: wstęga przyśrodkowa, prawo i medycyna czasopismo, trening umiejętności społecznych dla dzieci ]

Powiązane tematy z artykułem: prawo i medycyna czasopismo trening umiejętności społecznych dla dzieci wstęga przyśrodkowa