Skip to content

Zanieczyszczona heparyna związana z niekorzystnymi zdarzeniami klinicznymi i aktywacją systemu kontaktowego ad 5

1 miesiąc ago

506 words

Obecność OSCS w heparynie była związana z indukcją aktywności kalikreiny. Dwadzieścia dziewięć próbek heparyny, reprezentujących zarówno podejrzane partie heparynowe, jak i kontrolne, analizowano w sposób zaślepiony zarówno pod względem obecności OSCS, jak i zdolności do aktywacji kalikreiny (Panel B). Obecność OSCS wykryto i określono ilościowo za pomocą jednowymiarowej spektroskopii jądrowego rezonansu magnetycznego (patrz Figura 2 w Dodatku Aneks). Procent każdej próbki, który był OSCS, pokazano poniżej wykresu. Aktywność amidolityczną kalikreiny oceniano przy różnych stężeniach heparyny; Próbka 7 nie była analizowana pod kątem aktywności kalikreiny ze względu na ograniczoną dostępną ilość. ND oznacza niewykrywalną gęstość optyczną OD. W panelu A, pręty T wskazują odchylenia standardowe powtarzanych pomiarów. Biorąc pod uwagę związek aktywacji układu kontaktowego z ujemnie naładowanymi polisacharydami, staraliśmy się wyjaśnić, czy odpowiedź biologiczna in vitro może być skorelowana z tożsamością lub poziomami zanieczyszczeń w obrębie partii heparyny. W tym celu zbadaliśmy zdolność próbki heparyny zanieczyszczonej OSCS, zawierającej 19,3% wag./wag. OSCS (Tabela w Uzupełniającym dodatku), w celu aktywacji aktywności amidolitycznej kalikreiny w ludzkim osoczu (Figura 1A). Zanieczyszczona heparyna wykazała odpowiedź w kształcie dzwonu, która jest typowa dla odpowiedzi zależnych od glikozoaminoglikanów.5,10 Przy 2,5 i 25 .g na mililitr, silna aktywacja kalikreiny została stwierdzona dla próbki zanieczyszczonej heparyną, ale nie dla próbki kontrolnej nieskażonej heparyna. Stężenia te mieszczą się w zakresie klinicznie skutecznego stężenia heparyny około do 5 .g na mililitr, w oparciu o aktywność właściwą około 180 U na miligram. Wysokie stężenia heparyny zanieczyszczonej przez OSCS (250 .g na mililitr) wywoływały niewielką lub żadną aktywność amidolityczną kallikreiny, co sugeruje, że w tym stężeniu heparyna może hamować lub powodować wyczerpanie czynnika XII, jak opisano wcześniej .7,11,12 To wysoki poziom. stężenie heparyny również zapobiegało aktywacji układu kontaktowego w odpowiedzi na kaolin, silny aktywator (dane nie pokazane).
W celu dalszej weryfikacji, czy zanieczyszczenie było odpowiedzialne za aktywację układu kontaktowego, OSCS oczyszczono do homogenności za pomocą chromatografii anionowymiennej, a następnie wytrącenia alkoholem. Ponadto, utworzono standard OSCS poprzez chemiczną sulfonowanie siarczanu chondroityny A, z wytworzeniem OSCS.4. Oczyszczone zanieczyszczenie i standard OSCS były identyczne, jak oceniano za pomocą kilku ortogonalnych technik analitycznych, w tym dwuwymiarowego NMR.4 Zarówno oczyszczone zanieczyszczenie. a syntetyczny OSCS wykazał silną aktywację aktywności kalikreiny na poziomie 0,25 .g i 2,5 .g na mililitr (Figura 1A). Szczytową aktywność oczyszczonego zanieczyszczenia i syntetycznego wzorca OSCS obserwowano na poziomie, który był w przybliżeniu o rząd wielkości niższy niż ten stwierdzony dla zanieczyszczonej próbki heparyny. Jest to zgodne z obserwacją, że OSCS stanowi około 20% zanieczyszczonej próbki. Siarczan chondroityny A nie wykazywał indukcji aktywności amidolitycznej.
Wyniki te są zgodne z obserwacjami Hojima i wsp. [5], którzy wykazali, że nadmiernie siarczanowana chondroityna, ale nie chondroityna A, B lub C, może aktywować szlak kininowy.
[hasła pokrewne: idiosynkrazja, dermaplast, trening umiejętności społecznych dla dzieci ]

Powiązane tematy z artykułem: dermaplast idiosynkrazja trening umiejętności społecznych dla dzieci