Skip to content

Zanieczyszczona heparyna związana z niekorzystnymi zdarzeniami klinicznymi i aktywacją systemu kontaktowego ad 6

1 miesiąc ago

463 words

Heparyna aktywowała także układ kontaktowy w układzie modelowym in vitro z udziałem oczyszczonych składników białkowych5,13, ale nie w osoczu 13, co sugeruje, że czynniki ujemne regulacyjne obecne w osoczu mogą zapobiegać aktywacji układu kontaktowego przez heparynę. Jednym z takich mechanizmów jest fakt, że heparyna wzmacnia zahamowanie czynnika XII za pośrednictwem antytrombiny III. Nasze wyniki wskazują, że OSCS, w przeciwieństwie do heparyny, ale podobny do siarczanu dekstranu, 13 może aktywować układ kontaktowy w osoczu. Pobrano 29 próbek heparyny pobranych od FDA, składających się z obu podejrzanych partii heparyny związanych ze zdarzeniami klinicznymi, jak również kontrolnych partii heparyny, w sposób zaślepiony zarówno pod względem obecności OSCS, jak i zdolności do aktywacji układu kontaktowego (rysunek 1B). . Występowała pełna zgodność między obecnością wykrywalnych ilości OSCS przez jednowymiarowy protonowy NMR a zdolnością próbki do indukowania silnej aktywności amidolitycznej kallikreiny (Figura 1B). Aktywność biologiczną ogólnie scharakteryzowano jako odpowiedź typu wszystko albo nic , przy czym wszystkie 13 próbek zawierało wykrywalne poziomy OSCS o odpowiedzi pozytywnej przy 25 .g lub 2,5 .g na mililitr. Próbka 11, która zawierała najwyższy poziom zanieczyszczenia (27,4%), wykazała również aktywność 0,25 .g na mililitr, podczas gdy Próbka 25, która zawierała najniższy poziom zanieczyszczenia (2,4%), wykazała jedynie niewielką aktywność przy 2,5 .g na mililitr. Przeciwnie, nie było związku między poziomem indukowalnej aktywności kalikreiny a poziomem siarczanu dermatanu (fig. 2 w dodatkowym dodatku), zanieczyszczeniem występującym w wielu preparatach heparyny.
Rysunek 2. Rysunek 2. Indukowana przez OSCS aktywacja kalikreiny w osoczu normalnym lub zubożonym w XII. Kontrolę niefrakcjonowanej heparyny (UFH), zanieczyszczonego OSCS UFH, siarczanu chondroityny A i syntetycznego OSCS inkubowano z prawidłowym osoczem (panel A) lub z osoczem zubożonym w czynnik XII (panel B); Indukowana OSCS aktywacja kalikreiny jest zależna od czynnika XII, jak wskazano. Bufor zawierający kaolin oceniono jako dodatni aktywator kontroli układu kontaktowego. Sam bufor jako kontrolę negatywną. Aktywność amidolityczną oceniano przez dodanie substratu chromagenowego S-2302 (D-Pro-Phe-Arg-p-nitroanilina). OD oznacza gęstość optyczną.
Bezpośrednia aktywacja układu kontaktowego przez zanieczyszczoną heparynę i syntetyczny standard OSCS została potwierdzona poprzez zastosowanie ludzkiego osocza zubożonego w czynnik XII, górny aktywator prekalikreiny14 (Figura 2). Zanieczyszczona heparyna, syntetycznie otrzymany OSCS i kontrola pozytywna (odczynnik zawierający kaolin) nie wywoływały amidolitycznej aktywności kallikreiny w osoczu z niedoborem czynnika XII.
Rycina 3. Rycina 3. Oscos i wytwarzanie anafilatoksyny C5a z komplementarnym dopełniaczem w osoczu ludzkim. Heparyna niefrakcjonowana (UFH) zanieczyszczona OSCS i kontrola UFH (0,5 do 500 .g na mililitr) (Panel A) lub siarczan chondroityny A, syntetyczny OSCS i oczyszczone zanieczyszczenie OSCS (0,005 do 50 .g na mililitr) (Panel B) inkubowano z normalna plazma antykoagulująca z EDTA. Wytwarzanie C5a oceniano za pomocą testu ELISA
[podobne: ekg wrocław, stomia wklęsła, dermaplast ]

Powiązane tematy z artykułem: dermaplast ekg wrocław stomia wklęsła