Skip to content

Zanieczyszczona heparyna związana z niekorzystnymi zdarzeniami klinicznymi i aktywacją systemu kontaktowego czesc 4

1 miesiąc ago

469 words

Aktywność amidolityczną kalikreiny (z niewielkim udziałem czynnika XII) 9 oceniano przez dodanie substratu chromagenowego S-2302 (D-Pro-Phe-Arg-p-nitroanilina [pNA]) przez 30 minut w 37 ° C, a następnie przez spektrofotometryczny pomiar absorbancji przy 450 nM. Generacja C3a i C5a
Połączone ludzkie osocze z EDTA lub osocze zubożone w czynnik XII (American Diagnostica) traktowano różnymi stężeniami heparyny zanieczyszczonej OSCS, kontrolnej heparyny, siarczanu chondroityny A lub syntetycznego OSCS przez 30 minut w 37 ° C. Produkty aktywacji C3a i C5a kaskady dopełniacza badano za pomocą testu immunoenzymatycznego typu sandwich-enzym (ELISA), jak określono w instrukcji producenta (Becton Dickinson and Integrated Biotech Laboratories odpowiednio dla C3a i C5a).
W studiach Vivo
Świnie były traktowane i traktowane zgodnie z Polityką Zdrowia Publicznego w zakresie humanitarnej opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych oraz federalną ustawą o dobrostanie zwierząt. Procedury eksperymentalne zostały przeprowadzone zgodnie z zatwierdzonym przez Komitet Komitetem ds. Ochrony Zwierząt i Zastosowań Zwierząt Instytutu Politechniki Wirginii i Uniwersytetu Stanowego w Blacksburgu. Świnie z rodziny Cross Yorkshire z obu płci (Virginia Polytechnic Institute i State University) miały wagę od 10 do 25 kg. Początkowo znieczulano je dożylną iniekcją 6 mg chlorowodorku tiletaminy na kilogram masy ciała i 2,2 mg ksylazyny na kilogram, a następnie cewnikiem silikonowym z pojedynczym światłem wszczepiono lewą żyłę szyjną każdego zwierzęcia. Podczas całej procedury utrzymywano odpowiednie znieczulenie przez podawanie dodatkowej tiletaminy. Po 5-minutowym okresie stabilizacji każda świnia otrzymała wlew dożylny w bolusie w ilości 5 mg badanej substancji na kilogram (od trzech do sześciu świń na badaną substancję). Wszystkie świnie były nieprzerwanie monitorowane pod kątem parametrów życiowych za pomocą oscylometrycznego monitora ciśnienia krwi (Cardell 9401/9403, CAS Medical Systems) dla skurczowego, rozkurczowego i średniego ciśnienia krwi tętniczej, pulsoksymetru dla tętna i częstości oddechów oraz odbytnicy. sonda do pomiaru temperatury ciała. Pod koniec 60-minutowego okresu obserwacji zwierzęta uśmiercano za pomocą dożylnej infuzji Fatal Plus (Vortech Pharmaceuticals) w dawce 0,22 ml na kilogram. Próbki krwi zebrano w punkcie wyjściowym i po 5, 10, 20, 40 i 60 minutach i trzymano w 5 mM EDTA. Osocze izolowano po odwirowaniu w 4 ° C i błyskawicznie zamrożono na suchym lodzie. Zamrożone próbki rozmrożono w 4 ° C i testowano na aktywność amidolityczną kalikreiny z dodatkiem substratu chromagenowego S-2302 (D-Pro-Phe-Arg-pNA), jak opisano powyżej.
Wyniki
Rysunek 1. Rysunek 1. Wpływ OSCS na aktywność kalikreiny. Połączone próbki ludzkiego osocza traktowano kontrolną niefrakcjonowaną heparyną (UFH) lub zanieczyszczoną przez OSCS heparyną (0,025 do 250 .g na mililitr) lub siarczanem chondroityny A, syntetycznym OSCS lub oczyszczonym zanieczyszczeniem OSCS (0,0025 do 25 .g na mililitr). Aktywność amidolityczną oceniano przez dodanie substratu chromagenowego S-2302 (D-Pro-Phe-Arg-p-nitroanilina); pokazano wpływ na aktywność amidolityczną kallikreiny (Panel A)
[przypisy: terapia miorelaksacyjna, badania w kierunku cukrzycy, lista leków dla seniorów ]

Powiązane tematy z artykułem: badania w kierunku cukrzycy lista leków dla seniorów terapia miorelaksacyjna